(Fluocitometrio, FCM) estas ĉelanalizilo, kiu mezuras la fluoreskan intensecon de makulitaj ĉelmarkiloj. Ĝi estas altteknologia teknologio evoluigita surbaze de la analizo kaj ordigo de unuopaj ĉeloj. Ĝi povas rapide mezuri kaj klasifiki la grandecon, internan strukturon, DNA-on, RNA-on, proteinojn, antigenojn kaj aliajn fizikajn aŭ kemiajn ecojn de ĉeloj, kaj povas baziĝi sur la kolekto de ĉi tiuj klasifikoj.
Fluocitometro ĉefe konsistas el la jenaj kvin partoj:
1 Flukamero kaj fluidika sistemo
2 Lasera lumfonto kaj radioformadsistemo
3 Optika sistemo
4 Elektroniko, stokado, ekrano kaj analiza sistemo
5 Ĉela ordiga sistemo
Inter ili, lasera ekscito en la lasera lumfonto kaj la faskoforma sistemo estas la ĉefa mezurado de fluoreskaj signaloj en fluocitometrio. La intenseco de la ekscita lumo kaj la ekspontempo rilatas al la intenseco de la fluoreska signalo. Lasero estas kohera lumfonto, kiu povas provizi unu-ondolongan, alt-intensan kaj alt-stabilecan lumigon. Ĝi estas la ideala ekscita lumfonto por plenumi ĉi tiujn postulojn.
Estas du cilindraj lensoj inter la laserfonto kaj la flukamero. Ĉi tiuj lensoj enfokusigas laseran radion kun cirkla sekco elsendita de la laserfonto en elipsan radion kun pli malgranda sekco (22 μm × 66 μm). La lasera energio ene de ĉi tiu elipsa radio estas distribuita laŭ normala distribuo, certigante koheran lumintensecon por ĉeloj pasantaj tra la lasera detektareo. Aliflanke, la optika sistemo konsistas el pluraj aroj de lensoj, pinglotruoj kaj filtriloj, kiuj povas esti malglate dividitaj en du grupojn: kontraŭflue kaj laŭflue de la flukamero.
La optika sistemo antaŭ la fluokamero konsistas el lenso kaj pinglotruo. La ĉefa funkcio de la lenso kaj pinglotruo (kutime du lensoj kaj pinglotruo) estas fokusigi la laseran radion kun cirkla sekco elsendita de la laserfonto en elipsan radion kun pli malgranda sekco. Tio distribuas la laseran energion laŭ normala distribuo, certigante koheran lumintensecon por ĉeloj trans la lasera detektareo kaj minimumigante interferon de devaga lumo.
Estas tri ĉefaj tipoj de filtriloj:
1: Longpasa filtrilo (LPF) - nur permesas lumon kun ondolongoj pli altaj ol specifa valoro trapasi.
2: Mallongpasa filtrilo (SPF) - nur permesas lumon kun ondolongoj sub specifa valoro trapasi.
3: Bendpasa filtrilo (BPF) - permesas trapasi nur lumon en specifa ondolonga gamo.
Malsamaj kombinaĵoj de filtriloj povas direkti fluoreskajn signalojn je malsamaj ondolongoj al individuaj fotomultiplikaj tuboj (PMT-oj). Ekzemple, filtriloj por detekti verdan fluoreskon (FITC) antaŭ PMT estas LPF550 kaj BPF525. La filtriloj uzataj por detekti oranĝruĝan fluoreskon (PE) antaŭ la PMT estas LPF600 kaj BPF575. La filtriloj por detekti ruĝan fluoreskon (CY5) antaŭ la PMT estas LPF650 kaj BPF675.
Fluocitometrio estas ĉefe uzata por ĉelsortigo. Kun la progreso de komputila teknologio, la disvolviĝo de imunologio kaj la invento de monoklona antikorpa teknologio, ĝiaj aplikoj en biologio, medicino, farmacio kaj aliaj kampoj fariĝas pli kaj pli vastaj. Ĉi tiuj aplikoj inkluzivas ĉeldinamikan analizon, ĉelan apoptozon, ĉeltipadon, tumordiagnozon, analizon de medikamenta efikeco, ktp.
Afiŝtempo: 21-a de septembro 2023
