(Flua citometrio, FCM) estas ĉela analizilo, kiu mezuras la fluoreskan intensecon de makulitaj ĉelaj markiloj. Ĝi estas altteknologia teknologio disvolvita surbaze de la analizo kaj ordigo de unuopaj ĉeloj. Ĝi povas rapide mezuri kaj klasifiki la grandecon, internan strukturon, DNA, RNA, proteinojn, antigenojn kaj aliajn fizikajn aŭ kemiajn proprietojn de ĉeloj, kaj povas baziĝi sur la kolekto de ĉi tiuj klasifikoj.
Flua citometro plejparte konsistas el la jenaj kvin partoj:
1 flua ĉambro kaj fluida sistemo
2 lasera lumfonto kaj trabo formanta sistemon
3 Optika Sistemo
4 Elektronika, Stokado, Montrado kaj Analiza Sistemo
5 ĉela ordiga sistemo
Inter ili, lasera ekscitiĝo en la lasera lumfonto kaj trabo -formado estas la ĉefa mezurado de fluoreskaj signaloj en flua citometrio. La intenseco de la ekscita lumo kaj la ekspozicia tempo rilatas al la intenseco de la fluoreska signalo. Lasero estas kohera lumfonto, kiu povas provizi unu-ondolongon, altan intensecon kaj altan stabilecon. Ĝi estas la ideala ekscita lumfonto por plenumi ĉi tiujn postulojn.
Estas du cilindraj lensoj inter la lasera fonto kaj la flua ĉambro. Ĉi tiuj lensoj fokusas laseron-trabon kun cirkla transversa sekcio elsendita de la lasera fonto en elipsan trabon kun pli malgranda transversa sekcio (22 μm × 66 μm). La lasera energio ene de ĉi tiu elipsa trabo estas distribuita laŭ normala distribuo, certigante konsekvencan lumigan intensecon por ĉeloj pasantaj tra la lasero -detekta areo. Aliflanke, la optika sistemo konsistas el multnombraj aroj de lensoj, pinholes, kaj filtriloj, kiuj povas esti proksimume dividitaj en du grupojn: supren kaj sube de la fluo -ĉambro.
La optika sistemo antaŭ la flua ĉambro konsistas el lenso kaj pinhole. La ĉefa funkcio de la lenso kaj pinhole (kutime du lensoj kaj pinĉilo) estas fokusi la laseron-trabon kun cirkla transversa sekcio elsendita de la lasera fonto en elipsan trabon kun pli malgranda transversa sekcio. Ĉi tio distribuas la laseron -energion laŭ normala distribuo, certigante konsekvencan lumigan intensecon por ĉeloj tra la lasero -detekta areo kaj minimumigante interferon de senbrida lumo.
Estas tri ĉefaj specoj de filtriloj:
1: Longa pasa filtrilo (LPF) - nur permesas lumon kun ondolongoj pli altaj ol specifa valoro trapasi.
2: Mallong -pasa filtrilo (SPF) - nur permesas lumon kun ondolongoj sub specifa valoro trapasi.
3: Bandpass Filter (BPF) - nur permesas lumon en specifa ondolonga gamo.
Malsamaj kombinaĵoj de filtriloj povas direkti fluoreskajn signalojn ĉe malsamaj ondolongoj al individuaj fotomultiplier -tuboj (PMToj). Ekzemple, filtriloj por detekti verdan fluoreskecon (FITC) antaŭ PMT estas LPF550 kaj BPF525. La filtriloj uzataj por detekti oranĝ-ruĝan fluoreskecon (PE) antaŭ la PMT estas LPF600 kaj BPF575. La filtriloj por detekti ruĝan fluoreskecon (CY5) antaŭ la PMT estas LPF650 kaj BPF675.
Flua citometrio estas uzata ĉefe por ordigo de ĉeloj. Kun la progresado de komputila teknologio, la disvolviĝo de imunologio kaj invento de monoklona antikva teknologio, ĝiaj aplikoj en biologio, medicino, apoteko kaj aliaj kampoj pli kaj pli disvastiĝas. Ĉi tiuj aplikoj inkluzivas ĉelan dinamikan analizon, ĉelan apoptozon, ĉelan tajpadon, tumoron -diagnozon, analizon de efikeco de drogoj, ktp.
Afiŝotempo: Sep-21-2023
