( Fluocitometrio , FCM ) estas ĉelanalizilo kiu mezuras la fluoreskecintensecon de makulitaj ĉelaj signoj. Ĝi estas altteknologia teknologio evoluigita surbaze de la analizo kaj ordigo de unuopaj ĉeloj. Ĝi povas rapide mezuri kaj klasifiki la grandecon, internan strukturon, DNA, RNA, proteinojn, antigenojn kaj aliajn fizikajn aŭ kemiajn ecojn de ĉeloj, kaj povas esti bazita sur la kolekto de ĉi tiuj klasifikoj.
Fluocitometro plejparte konsistas el la sekvaj kvin partoj:
1 Flukamero kaj fluidika sistemo
2 Lasera lumfonto kaj faskoforma sistemo
3 Optika sistemo
4 Elektroniko, stokado, ekrano kaj analizsistemo
5 Ĉela ordiga sistemo
Inter ili, lasera ekscito en la lasera lumfonto kaj trabo formanta sistemon estas la ĉefa mezurado de fluoreskecaj signaloj en fluocitometrio. La intenseco de la ekscita lumo kaj la ekspontempo estas rilataj al la intenseco de la fluoreskeca signalo. Lasero estas kohera lumfonto, kiu povas provizi unuondolongan, altintensan kaj altstabilecan lumigadon. Ĝi estas la ideala ekscita lumfonto por plenumi ĉi tiujn postulojn.
Estas du cilindraj lensoj inter la laserfonto kaj la flukamero. Tiuj lensoj enfokusigas laseran radion kun cirkla sekco elsendita de la laserfonto en elipsan trabon kun pli malgranda sekco (22 μm × 66 μm). La laserenergio ene de ĉi tiu elipsa fasko estas distribuita laŭ normala distribuo, certigante konsekvencan lumintensecon por ĉeloj pasantaj tra la lasera detekta areo. Aliflanke, la optika sistemo konsistas el multoblaj aroj de lensoj, pintruoj, kaj filtriloj, kiuj povas esti malglate dividitaj en du grupojn: kontraŭflue kaj laŭflue de la flukamero.
La optika sistemo antaŭ la flukamero konsistas el lenso kaj pintruo. La ĉeffunkcio de la lenso kaj stiftotruo (kutime du lensoj kaj stiftotruo) devas enfokusigi la laserradion kun cirkla sekco elsendita per la laserfonto en elipsan trabon kun pli malgranda sekco. Ĉi tio distribuas la laseran energion laŭ normala distribuo, certigante konsekvencan lumintensecon por ĉeloj tra la lasera detekta areo kaj minimumigante interferon de vaga lumo.
Estas tri ĉefaj specoj de filtriloj:
1: Longpasa filtrilo (LPF) - nur permesas trapasi lumon kun ondolongoj pli altaj ol specifa valoro.
2: Mallong-pasa filtrilo (SPF) - nur permesas trapasi lumon kun ondolongoj sub specifa valoro.
3: Bandpass-filtrilo (BPF) - nur permesas trapasi lumon en specifa ondolongo.
Malsamaj kombinaĵoj de filtriloj povas direkti fluoreskecsignalojn ĉe malsamaj ondolongoj al individuaj fotomultiplikaj tuboj (PMToj). Ekzemple, filtriloj por detektado de verda fluoreskeco (FITC) antaŭ PMT estas LPF550 kaj BPF525. La filtriloj uzitaj por detekti oranĝ-ruĝan fluoreskecon (PE) antaŭ la PMT estas LPF600 kaj BPF575. La filtriloj por detektado de ruĝa fluoreskeco (CY5) antaŭ la PMT estas LPF650 kaj BPF675.
Flua citometrio estas ĉefe uzata por ĉelordigo. Kun la progreso de komputila teknologio, la evoluo de imunologio kaj la invento de unuklona antikorpa teknologio, ĝiaj aplikoj en biologio, medicino, apoteko kaj aliaj kampoj pli kaj pli disvastiĝas. Ĉi tiuj aplikoj inkluzivas analizon pri ĉela dinamiko, ĉela apoptozo, ĉeltajpado, tumordiagnozo, analizo pri drogefikeco ktp.
Afiŝtempo: Sep-21-2023
